实现蛋白定位的定量映射（quantitative mapping of protein localization），是理解蛋白质功能、调控机制以及疾病状态下细胞行为的关键步骤。近年来，随着质谱（Mass Spectrometry, MS）技术的发展，研究者已经可以在亚细胞水平上对蛋白质的定位进行高通量、定量化的分析。

一、蛋白定位定量映射的核心意义

细胞功能依赖于蛋白质的正确定位与时空动态调控。很多蛋白具有多重定位特性（moonlighting functions），其活性依赖于它在细胞膜、线粒体、胞核或细胞质中的分布。例如：

• P53定位于细胞核时参与DNA修复，定位于细胞质时调控凋亡；
• AKT激酶的膜定位是其激活信号通路的必要条件。

因此，系统性地定量绘制蛋白质在细胞或组织中各亚细胞结构中的分布图谱，能够提供重要的功能线索、信号通路机制以及疾病靶点信息。

二、实现蛋白定位定量映射的主流技术路径

1、亚细胞分馏 + 定量质谱

这是目前最常用的策略之一。

• 亚细胞分馏：通过差速离心、密度梯度离心或商业试剂盒，将细胞分为核、线粒体、细胞质、膜等组分；
• 蛋白提取与酶解：各组分蛋白单独提取，胰蛋白酶酶解；
• 定量标记：可采用TMT/iTRAQ等异位标记，或Label-free方法；
• LC-MS/MS分析：高分辨质谱进行蛋白鉴定与定量；
• 数据分析：结合参考数据库（如 GO cellular component）、主成分分析（PCA）或机器学习方法实现定位预测与可视化。

• 高通量、可定量；
• 可实现不同条件下的蛋白再定位分析（relocalization）；
• 与蛋白表达谱联动，深入解析定位动态变化。

• 分馏纯度影响定位准确性；
• 易丢失膜蛋白等难提取组分；
• 组织样本操作复杂度较高。

2、蛋白组学结合空间转录组学

空间转录组学（Spatial Transcriptomics）提供了组织切片上的基因表达空间分布，而当它与蛋白质组学结合时，可间接推断蛋白定位。

（1）技术路线：

• 在相同或连续切片上分别进行空间转录组测序与蛋白组学检测；
• 通过空间注册算法整合两个数据维度；
• 利用转录本位置预测蛋白在组织中的潜在分布。

（2）应用前景：

适用于组织切片级别的区域蛋白表达图谱重建，在肿瘤异质性、组织发育研究中具有广泛前景。

3、基于生物素化标记的邻近标记技术（如 APEX, BioID）

• 将目标蛋白融合APEX或BioID等酶，在活细胞内表达；
• 这些酶可在极短时间内对其周围邻近蛋白进行共价标记；
• 随后通过质谱鉴定标记蛋白，确定其亚细胞“邻域”分布。

• 纳米级定位精度；
• 动态实时监测可能性；
• 对研究蛋白质互作与微环境极具价值。

注意：该方法依赖基因编辑或过表达系统，适用于机制研究而非高通量测序。

三、数据分析与定位预测的关键要点

1、多维度数据融合

• 蛋白质丰度、肽段特异性、GO注释、亚细胞marker蛋白库等应联合使用，以提升定位预测准确率。

2、可视化工具

• 使用t-SNE、UMAP等降维方法进行分布图可视化；
• 结合R/Bioinformatics包（如 pRoloc, MSnbase）实现亚细胞预测建模与交互式分析。

3、蛋白再定位分析

• 在处理如药物刺激、疾病模型数据时，需重点关注蛋白在不同条件下的迁移（translocation）行为；
• 百泰派克生物科技可提供多条件TMT设计，精准量化这种动态变化。

四、应用场景与研究价值

五、百泰派克生物科技的蛋白定位定量解决方案优势

在蛋白质亚细胞定位定量研究中，百泰派克生物科技提供一站式高分辨率蛋白组学服务，包括：

• 优化亚细胞分馏策略，兼顾细胞与组织样本；
• 高灵敏度Orbitrap Fusion Lumos平台，支持10plex/16plex TMT分析；
• 全流程生物信息分析支持，助力定位预测与可视化；
• 可定制化蛋白再定位研究方案，适配药物处理、基因干扰等实验设计。

蛋白定位的定量映射正逐渐成为精准生命科学研究的新基石。通过整合亚细胞分馏、质谱定量与生物信息学建模，科研人员可以以前所未有的深度洞察蛋白质的空间动态特征。如果您正在开展与蛋白定位相关的研究，欢迎联系百泰派克生物科技，我们将为您提供从样本处理到深度数据解读的一站式解决方案，助力科研成果突破与高水平发表。

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百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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